常規兔源多克隆抗體定制服務常規小鼠源多克隆抗體定制服務常規大鼠源多克隆抗體定制服務常規雞源多克隆抗體制備服務快速抗體制備服務多克隆抗體制備服務小鼠源單克隆抗體定制服務大鼠源單克隆抗體定制服務倉鼠源單克隆抗體定制服務兔子單克隆抗體制備雞單克隆抗體制備猴子單克隆抗體制備犬單克隆抗體制備單克隆抗體/雜交瘤細胞定制服務免疫組化保證性抗體制備轉錄后特殊修飾結構識別抗體制備抗專一亞型抗體制備配體模擬激活性抗體制備捕獲\報告配對抗體制備功能阻遏\專一型抗抗體制備特殊功能抗體制備服務膜蛋白抗體制備服務半抗原抗體制備服務脂質體免疫抗體制備服務自體抗原抗體制備服務特殊性質抗原抗體制備服務基于全細胞抗原呈遞的抗體制備方案基于傳統單克隆抗體制備方案G蛋白偶聯受體抗體制備服務抗離子通道蛋白抗體制備服務抗膜蛋白抗體制備專題噬菌體展示文庫構建工程化骨架蛋白文庫構建限制性多肽文庫構建噬菌體展示文庫篩選內化抗體篩選熱穩定性scFv/Fab篩選蛋白酶底物篩選單域抗體庫構建全人源單抗制備噬菌體展示和抗體文庫服務雙特異性納米抗體制備單域(納米)抗體庫構建納米抗體親和力成熟服務人源/人源化納米抗體制備DNA免疫技術制備膜蛋白納米抗體抗血腦屏障納米抗體制備納米抗體服務細菌展示服務核糖體展示服務酵母展示服務體外展示&其他服務酵母雙雜交篩選服務哺乳動物細胞雙雜交服務胞內抗體制備服務雙雜交服務原位雜交ISH熒光原位雜交FISH原位雜交服務X-射線晶體學通過肽庫方法通過LC-MS法通過三維電鏡方法基于生物信息學預測單克隆抗體表位作圖抗體測序服務表面等離子共振服務(SPR)等溫滴定量熱法服務(ITC)雙偏振極化干涉測量服務(DPI)差示掃描量熱法服務(DSC)免疫原性評價抗體親和力檢測抗體鑒定抗體分析服務二價和雙特異性scFv/Fab服務嵌合抗原受體(CAR)構建服務嵌合IgG構建scFV/Fab構建雙可變區免疫球蛋白制備服務定制半胱氨酸改型抗體超長CDR3s??固逯票?/a>非猴抗體的硅烷化抗體穩定性改進抗體親和力成熟抗體人源化服務抗體經典化服務人源抗體駱駝化服務人源抗體初始化服務抗體工程服務雙特異性T細胞銜接器(BiTE)Fab-scFv融合蛋白KNODBS-INTO-HOLE技術雜交瘤細胞系雙特異性抗體抗體和蛋白標記抗體生物素化Fab PEG化抗體偶聯藥物納米金標記抗體糖納米粒標記抗體標記服務酶和蛋白定向進化突變庫構建服務蛋白工程服務抗體人源化親和力成熟人源化牛超長CDR3抗體服務人源化納米抗體制備人源化猴單抗制備人源/人源化抗體服務蛋白/抗體偶聯服務生物素化服務寡聚糖生物偶聯寡核苷酸生物偶聯表面錨定服務脂質體偶聯服務PEG修飾服務合成聚合物修飾生物偶聯服務重組IgG制備scFv/Fab制備雙特異性抗體制備抗體和蛋白純化服務重組抗體制備服務穩定細胞系構建定制細胞裂解液穩定細胞系開發cGMP生產治療性抗體和蛋白生產大規模發酵服務cGMP生產大腸桿菌蛋白表達系統枯草芽孢桿菌表達系統酵母蛋白表達系統昆蟲桿狀病毒表達系統哺乳動物細胞蛋白表達系統富含二硫鍵蛋白的原核表達服務無細胞系統蛋白表達服務Marzf單一蛋白制備服務蛋白表達與純化服務抗體&多肽文庫重組抗體產品雜交瘤細胞系穩定細胞系CAR-T載體抗體定制服務平臺噬菌體展示平臺抗體藥物開發平臺CAR-T平臺蛋白表達與純化平臺大規模發酵服務平臺基因測序平臺
穩定細胞系構建

穩定細胞系構建

副標題

服務簡介:

與瞬時轉染不同,穩定細胞系是指外源基因進入受體細胞,并整合到細胞的染色體上,使得宿主可以長期表達目的基因。穩定細胞系表達蛋白(抗體)的穩定性更好,批次間差異也更小,然而構建一個有效的細胞系是一件復雜而費時的工作——艾柏森專業的生物醫藥研發服務機構,擁有豐富的哺乳動物細胞培養經驗,基于公司多樣的成熟平臺,為您提供優質的穩定細胞系構建服務。

本公司服務包括但不限于下列服務項目:
1、基因過表達穩轉細胞細胞系構建服務(基因過表達多克隆細胞株構建服務、基因過表達單克隆細胞株構建服務):

因過表達細胞株構建服務包括目的基因過表達慢病毒載體構建、病毒包裝、細胞轉染和篩選。您只需提供目的基因的cDNA質粒和需要構建的細胞系,我們將按照您的要求完成目的基因過表達細胞株的構建和檢測,提供給您高質量的基因過表達穩定細胞株。
2、RNA干擾基因敲減穩轉細胞株篩選服務(RNA干擾基因敲減細胞株多克隆構建服務、RNA干擾基因敲減細胞株單克隆構建服務):

艾柏森的RNA干擾基因敲減細胞系構建基于慢病毒表達系統,一般采用U6啟動子驅動的pLVshRNA-puro或pLVshRNA-EGFP(2A)puro載體構建RNA干擾穩定細胞株,服務內容包括干擾載體構建、靶點篩選、干擾效率驗證及穩定細胞篩選和克隆。

3、CRISPR基因敲除穩定細胞株構建服務:

隨著talen和Cas9/gRNA基因敲除系統的出現,基因定點敲除的難度大幅下降。全新的技術將基因敲除從價格高昂,耗時漫長的ZNF系統,逐漸變成簡便的研究工具。現在我們可提供Talen和Cas9/gRNA兩個系統的基因敲除服務。包括基因敲除靶點設計,talen質粒組裝,Cas9/gRNA質粒構建及基因敲除效率驗證。


穩定細胞系構建.jpg


穩定轉染細胞株服務流程:
a、載體構建:將外源基因構建到合適的載體上。
b、細胞篩選濃度測定:以10-14天細胞全部死亡的抗生素濃度為篩選濃度。
c、細胞接種:轉染實驗前天接種細胞,各種細胞的平板密度依據各種細胞的生長率和細胞形狀而定。進行轉染當天細胞應達到60%-80%覆蓋。
d、細胞轉染:用構建好的載體轉染目的細胞。
e、使用抗生素對細胞進行篩選。
f、篩選結果鑒定;

穩定細胞株篩選方法:

1、轉染質粒后,單克隆方法篩選穩定細胞系:對大多數細胞轉染效率較低。對于基因過表達,如果轉染效率達到40%,基因過表達尚可。但是對于基因干擾實驗,對轉染效率要求遠遠高于基因過表達,通常質粒轉染無法滿足。

另外,質粒游離于細胞質中,很快降解,無法滿足較長時間的檢測項目;質粒轉染整合幾率極低,穩定細胞株構建耗時耗力,且得率很低,往往需要挑取單克隆株。
2、病毒感染篩選穩定細胞株:病毒感染方法較質粒轉染篩選單克隆方法更方便和高效,是目前主流的穩定細胞系篩選方法。用慢病毒制備穩轉細胞株,由于其高效整合、高效轉錄、高效表達、宿主范圍廣,感染效率高,且與細胞染色體整合而不發生基因重排,是制備穩定細胞株的理想載體。
服務優勢:
1、穩定:保證15代以內穩定轉染細胞穩定表達。
2、迅速:一般控制在1個月以內完成構建。
3、經濟:價格實惠,性價比高。
4、質量保證:對外源基因進行嚴格鑒定。

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