常規兔源多克隆抗體定制服務常規小鼠源多克隆抗體定制服務常規大鼠源多克隆抗體定制服務常規雞源多克隆抗體制備服務快速抗體制備服務多克隆抗體制備服務小鼠源單克隆抗體定制服務大鼠源單克隆抗體定制服務倉鼠源單克隆抗體定制服務兔子單克隆抗體制備雞單克隆抗體制備猴子單克隆抗體制備犬單克隆抗體制備單克隆抗體/雜交瘤細胞定制服務免疫組化保證性抗體制備轉錄后特殊修飾結構識別抗體制備抗專一亞型抗體制備配體模擬激活性抗體制備捕獲\報告配對抗體制備功能阻遏\專一型抗抗體制備特殊功能抗體制備服務膜蛋白抗體制備服務半抗原抗體制備服務脂質體免疫抗體制備服務自體抗原抗體制備服務特殊性質抗原抗體制備服務基于全細胞抗原呈遞的抗體制備方案基于傳統單克隆抗體制備方案G蛋白偶聯受體抗體制備服務抗離子通道蛋白抗體制備服務抗膜蛋白抗體制備專題噬菌體展示文庫構建工程化骨架蛋白文庫構建限制性多肽文庫構建噬菌體展示文庫篩選內化抗體篩選熱穩定性scFv/Fab篩選蛋白酶底物篩選單域抗體庫構建全人源單抗制備噬菌體展示和抗體文庫服務雙特異性納米抗體制備單域(納米)抗體庫構建納米抗體親和力成熟服務人源/人源化納米抗體制備DNA免疫技術制備膜蛋白納米抗體抗血腦屏障納米抗體制備納米抗體服務細菌展示服務核糖體展示服務酵母展示服務體外展示&其他服務酵母雙雜交篩選服務哺乳動物細胞雙雜交服務胞內抗體制備服務雙雜交服務原位雜交ISH熒光原位雜交FISH原位雜交服務X-射線晶體學通過肽庫方法通過LC-MS法通過三維電鏡方法基于生物信息學預測單克隆抗體表位作圖抗體測序服務表面等離子共振服務(SPR)等溫滴定量熱法服務(ITC)雙偏振極化干涉測量服務(DPI)差示掃描量熱法服務(DSC)免疫原性評價抗體親和力檢測抗體鑒定抗體分析服務二價和雙特異性scFv/Fab服務嵌合抗原受體(CAR)構建服務嵌合IgG構建scFV/Fab構建雙可變區免疫球蛋白制備服務定制半胱氨酸改型抗體超長CDR3s??固逯票?/a>非猴抗體的硅烷化抗體穩定性改進抗體親和力成熟抗體人源化服務抗體經典化服務人源抗體駱駝化服務人源抗體初始化服務抗體工程服務雙特異性T細胞銜接器(BiTE)Fab-scFv融合蛋白KNODBS-INTO-HOLE技術雜交瘤細胞系雙特異性抗體抗體和蛋白標記抗體生物素化Fab PEG化抗體偶聯藥物納米金標記抗體糖納米粒標記抗體標記服務酶和蛋白定向進化突變庫構建服務蛋白工程服務抗體人源化親和力成熟人源化牛超長CDR3抗體服務人源化納米抗體制備人源化猴單抗制備人源/人源化抗體服務蛋白/抗體偶聯服務生物素化服務寡聚糖生物偶聯寡核苷酸生物偶聯表面錨定服務脂質體偶聯服務PEG修飾服務合成聚合物修飾生物偶聯服務重組IgG制備scFv/Fab制備雙特異性抗體制備抗體和蛋白純化服務重組抗體制備服務穩定細胞系構建定制細胞裂解液穩定細胞系開發cGMP生產治療性抗體和蛋白生產大規模發酵服務cGMP生產大腸桿菌蛋白表達系統枯草芽孢桿菌表達系統酵母蛋白表達系統昆蟲桿狀病毒表達系統哺乳動物細胞蛋白表達系統富含二硫鍵蛋白的原核表達服務無細胞系統蛋白表達服務Marzf單一蛋白制備服務蛋白表達與純化服務抗體&多肽文庫重組抗體產品雜交瘤細胞系穩定細胞系CAR-T載體抗體定制服務平臺噬菌體展示平臺抗體藥物開發平臺CAR-T平臺蛋白表達與純化平臺大規模發酵服務平臺基因測序平臺
兔子單克隆抗體制備(Monoclonal Rabbit Antibody Production)

兔子單克隆抗體制備(Monoclonal Rabbit Antibody Production)

副標題

限于專利技術?;さ腦?,目前,全球兔單克隆雜交瘤細胞制備技術被一家公司壟斷,所以我們無法通過像類似制備小鼠單克隆抗體那樣,制備兔源雜交瘤細胞獲得兔源單克隆抗體。為此,公司在一大批免疫學與基因工程學專家的幫助下,先后建立了兩套兔源單克隆抗體制備方案。這兩種方案均不依賴于兔源骨髓瘤細胞,但是其抗體的種源特性毫無疑問是兔源,在保留兔源單克隆抗體優勢的同時,大大壓縮試驗周期,提高試驗成功率。

方案一噬菌體展示技術

M13單鏈絲狀噬菌體展示系統是目前應用最廣泛的文庫展示系統,通過將蛋白、抗體或多肽與噬菌體pIII蛋白融合表達,使之參與噬菌體組裝,并展示在噬菌體表面,形成噬菌體展示文庫。使用噬菌體展示文庫,針對特定靶分子進行3-5 輪親和篩選,可以富集能特異性結合靶分子的噬菌體,得到相應的DNA序列信息。

艾柏森(北京)生物科技有限公司目前開發的噬菌體展示技術服務平臺涵蓋了免疫抗體庫、天然抗體庫等常用的文庫類型,可根據客戶的特殊需求定制個性化文庫,并提供靈活高效的篩選服務。在此技術儲備的基礎上,我們提供的兔源單克隆抗體噬菌體展示方案,可高效靈活的根據客戶需要大規模探測高親和力抗體,同時結合公司專利的兔源Fc表達質粒,與高效真核表達系統,使得我們的抗體擁有極高的表達效率。

方案二重組抗體制備技術

艾柏森(北京)生物科技開發出一種革命性的單克隆抗體生產技術,使單克隆抗體的生產不殺害動物,不依賴雜交瘤。該技術通過分離培養B細胞,并利用ELISA、Western Blot、IHC(Immunohistochemistry)等方法篩選出抗原特異性B細胞。再通過分子克隆的手段重組表達完整的抗體分子。該技術可用于開發高品質的兔子和小鼠等不同物種的單克隆抗體。

其主要依托技術有:

高效的B細胞體外培養體系

高通量B細胞篩選技術

穩定的VH和VL抗體分子表達體系

高通量的抗體分子測序平臺

服務項目

服務項目

(Service Items)

周期(周)

Time(weeks)

方案一:

噬菌體展示技術

(Phage Display)

方案二:

異源表達重組技術

(Heterogeneous Recombination)

多肽

Peptide

小分子

Molecular

磷酸基/甲基/乙基化多肽

Phosphate/Methyl/

acetyl-specific

目前只有針對部分腫瘤相關通路熱點分子的抗原,詳情請與公司技術人員溝通

多肽設計與合成

Peptide design & synthesis

多肽設計

Peptide design

~2

可選,免費

多肽合成

Peptide synthesis





小分子或多肽偶聯

conjugation




免疫階段

Immunization

免疫2只兔子

Immunized 2 rabbits

~8

ELISA檢測

Elisa detection

cDNA制備

cDNA preparation

逆轉錄制備cDNA文庫

prepare cDNA library by RT-PCR

~1

cDNA 文庫質檢

cDNA library QC check

構建Fab抗體庫

Fab library   construction

VH與VL基因獲得

obtained VH and VL   genes

10~15

構建初級抗體庫

primary antibody   library construction

構建Fab抗體庫

Fab library   construction

噬菌體篩選

phage screening

噬菌體顆粒包裝

phage particles package

10~15


磁珠親和篩選

magnetic beads affinity screening


陽性克隆回收基因測序

Recover positive clones and DNA sequencing


抗體表達

Antibody expression

特異性雙鏈基因合成與Fc基因橋接

synthetic of target   phage gene and Fc gene

~5

構建真核表達載體

Eukaryotic system   expression plasmids construction

真核表達

Eukaryotic system   expression


穩轉細胞系構建

Stably transfected   cell line construction




純化與檢測

Purification and detection

標簽純化

Tag affinity purification

~1

特異性親和純化

Antigen specific affinity purification

總周期(月)

Total lead   time(months)

7~9

3~5













注:

價格面議;

請慎重考慮周期事宜,以上時間僅為理想條件下最短周期;

為了縮短試驗周期建議考慮自行提供抗原直接免疫做起;

免疫環節設立第一個驗收節點,效價合格,取脾臟,效價不合格,終止實驗;

抗體庫構建步驟啟動之前,至少支付此步驟的50%全款;完成項目,支付尾款。

服務組合:

客戶:提供抗原蛋白信息

制備流程:

1)抗原制備\質粒表達蛋白純化\多肽設計合成及交聯;

2)免疫:首次免疫兔子2只,失敗后又加免3只;

3)ELISA/Western-blot試驗監控兔子血清中的抗體效價和特異性,根據ELISA和WB檢測,篩選兔子;

4)cDNA文庫制備與噬菌體載體構建;

5)磁珠鏈霉素親和篩??;

6)陽性克隆測序與基因合成橋接;

7)真核表達質粒構建;

8)穩轉細胞構建;

9)試表達鑒定與結果交付;

交付產品(每種抗原,所有兔子總共的)

1)1株針對免疫原特異性的單克隆雜交瘤細胞株

2)1ml(濃度約0.1~1mg/ml)純化的抗體,Elisa效價應至少1:200以上;

制備時間:3~6個月

成功案例:

Publication: Plos One

IF:3.05

Title:TSC1/2 signaling complex is essential for peripheral na?ve CD8+ T   cell survival and homeostasis in mice.

Name:anti- Tuberin antibody

Species: Mouse

Type:Rabbit Recombination Monoclonal antibody

兔子單克隆抗體制備.1.jpg

兔子單克隆抗體制備.2.png

Immunohistochemical analysis ofparaffin-embedded mouse placenta tissue using anti-Tuberin antibody. Counterstained with hematoxylin.

Recommended constration: 1:200

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